1、将要保存的菌种接种于LB液体培养基中至对数生长期；

2、将甘油稀释至浓度为百分之五十；

3、将甘油、2毫升离心管、枪头等试验用品于121度灭菌20分钟；

4、无菌条件下将菌液与百分之五十浓度甘油1比1等体积混合于离心管中，甘油终浓度为百分之二十五；

5、将菌种和甘油的混合液于零下20度的冰箱内保存。