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对照试验的方法步骤，悬尾试验在学习实验的基础知识上更进一步
对照试验的方法步骤，悬尾试验在学习实验的基础知识上更进一步
2024-06-29 05:14:24  作者:凶手是谁  网址:https://m.xinb2b.cn/know/nni162326.html

小鼠悬尾测试整个测试周期通常持续6分钟。悬尾试验是药物发现中有价值的工具，可用于高通量筛选潜在的抗抑郁化合物。今天给大家分享一下悬尾实验的测试过程细节，特别强调可能出现的潜在问题以及如何避免。小鼠悬尾试验可用于筛选潜在的抗抑郁药，并评估预期影响抑郁相关行为的行动。测试时，用胶带将老鼠的尾巴吊起来，使其无法逃脱或抓住附近的物体。

对照试验的方法步骤，悬尾试验在学习实验的基础知识上更进一步(1)

实验材料

悬尾实验箱的选择

悬尾实验箱通常由塑料制成，尺寸通常为55cm高* 60cm*宽* 11.5cm深。为了防止动物相关的观察或相互作用，实验箱中间有一个挡板将小白鼠隔开。同时保证每只小鼠的隔间足够宽敞，让小鼠碰不到墙。每个隔间的尺寸建议不低于这个尺寸:55cm高* 15cm*宽* 11.5cm深。小鼠的鼻子和实验室箱子的地板之间的大致距离建议为20-25厘米。

对照试验的方法步骤，悬尾试验在学习实验的基础知识上更进一步(2)

悬尾实验测试箱，XR-XX203，上海欣软

在每个隔间的顶部，安装了一个铝制的吊杆来悬挂鼠标的尾巴。需要注意的是，如果使用大的远交小鼠品系(如CD-1)，则需要相应增加尾吊箱各隔室的尺寸。在每个隔间的底部，放置一个可移动的铝制托盘来收集动物的排泄物。

胶带的选择

胶带是我们日常生活中的常用工具，但在悬尾测试中，胶带的选择至关重要。胶带要牢固地贴在小鼠的尾巴和背带上，强度要足以承受被测老鼠的重量。同时，胶带不要太粘，因为我们会在每次测试后将动物取下，避免对动物造成疼痛应激。这里建议选择医用胶带，动物的尾皮层接近人类的皮肤。另外，胶带要贴在每只老鼠的尾巴上，而且要尽量保持均匀。

悬尾行为分析软件

悬尾分析软件核心算法的选择也很重要。悬尾实验与旷场实验等测试不同，不应该跟踪动物的质心/重心。VisuTrack动物行为分析软件(上海欣软)通过调查小鼠四肢的真实动作，实时分析小鼠摇摆(绝望状态)、挣扎行为等指标，自动存储原始实验视频。

对照试验的方法步骤，悬尾试验在学习实验的基础知识上更进一步(3)

上海欣软，VisuTrack AI版动物行为分析软件 ，悬尾实验

白噪声发生器(可选)

噪声发生器可以掩盖间歇或突然的环境声音。建议使用噪音发生器，尤其是在实验室环境中，因为在这种环境中会听到可能惊吓老鼠的突然巨响。在一些实验室中，环境噪声水平(白噪声发生器未激活)约为60分贝。在TST位置激活白噪声发生器的总声级是70-72 dB。但是，需要注意的是，这些数字仅作为示例提供，每个实验室应根据其独特的环境和情况选择合适的噪声水平。

清洁设备

每次试验后，用消毒液彻底擦拭悬尾箱。

丙烯酸套管(可选)

为了有效防止小鼠在测试过程中长时间攀爬，可以在小鼠尾部使用亚克力套，然后悬挂起来。具体方法可以参考下面的视频。效果很棒！

实验测试方法

1.调整摄像机，尽可能靠近动物，以获得高清视频。

2.打开白噪声发生器以覆盖外部噪声。避免高音量，并确保所有动物使用相同水平的白噪音。

3.将待测试的小鼠带入测试室进行适应，一般至少一个小时。请注意，放置在同一房间的其他动物可以感知气味和超声波信号。

4.把胶带贴在老鼠的尾巴上。使用胶带有标记的一端，确保胶带粘到尾部并再次粘到自身。胶带应贴在尾端，在胶带外留出2-3毫米的尾部。

5.在最短的时间内，将胶带或鼠标尾巴固定在悬尾 box顶部的钩子上，因为延迟太久会对小鼠造成压力。

6.使用VisuTrack软件预先设置的参数，采集分析实验6分钟。

7.将小鼠放回饲养笼后，从收集盘中丢弃粪便和尿液，并用消毒液擦拭设备。

实验“解密”

1.小鼠 悬尾实验持续时间通常为6分钟。与强迫游泳实验不同，小鼠在实验初期更容易表现出不动。

2.测试中，前肢只有小鼠运动，后肢不动，视为动物的摇摆行为(绝望状态)。

3.由于运动的惯性，小鼠的钟摆式活动也需要视为动物的摇摆行为(绝望状态)。

4.悬尾与强迫游泳实验相比，该实验没有因浸泡在水中而导致体温降低的风险。这两个实验在灵敏度和性能上有各种重要的差异，一个实验的结果可能无法在另一个实验中重复。

5.TST不建议使用体重较重的老鼠，因为这些动物仅靠尾巴支撑体重可能会很痛苦。同样，对于异常重的小鼠(如小鼠用于模拟肥胖)也要谨慎。在这些情况下，实验者应该寻找替代测试，如强迫游泳测试。

6.需要通过开放场实验提前测得小鼠的整体活性水平，可以有效防止悬尾实验中产生错误结论。

实验差异可参考以下篇文献：Cryan JF, Mombereau C, Vassout A. The tail suspension test as a model for assessing antidepressant activity: review of pharmacological and genetic studies in mice. Neurosci. Biobehav. Rev. 2005;29:571–625.O'Leary OF, Cryan JF. In: Mood and Anxiety Related Phenotypes in Mice. Gould TD, editor. Vol. 42. Humana Press; 2009. pp. 119–137.,
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